| Issue |
Agronomie
Volume 20, Number 8, December 2000
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|---|---|---|
| Page(s) | 869 - 874 | |
| DOI | https://doi.org/10.1051/agro:2000101 | |
DOI: 10.1051/agro:2000101
Efficient transient expression of the
Agronomie 20 (2000) 869-874
Efficient transient expression of the 
-glucuronidase
reporter gene in garlic (Allium sativum L.)
Esther Ferrer - Concha Linares - Juan M. González
Department of Cell Biology and Genetics, University of Alcalá, Campus Universitario,
28871 Alcalá de Henares, Madrid, Spain
(
Abstract:
A biolistic particle delivery system was used to introduce DNA containing a -glucuronidase
(gus) reporter gene under the control of the CaMV35S promoter in three different garlic
(Allium sativum L.) tissues: embryogenic calli, leaves and basal plate discs. Expression
of the reporter gene was assayed histochemically and fluorimetrically when the tissues
were bombarded with 1 
m diameter gold particles coated with DNA, at a distance of 3 cm
from the stopping plate and using 1100 psi rupture discs. Following bombardment, high
levels of -glucuronidase (GUS) were found without the need for treatment to block
previously reported putative endogenous nuclease activity.
-glucuronidase
(gus) reporter gene under the control of the CaMV35S promoter in three different garlic
(Allium sativum L.) tissues: embryogenic calli, leaves and basal plate discs. Expression
of the reporter gene was assayed histochemically and fluorimetrically when the tissues
were bombarded with 1 m diameter gold particles coated with DNA, at a distance of 3 cm
from the stopping plate and using 1100 psi rupture discs. Following bombardment, high
levels of -glucuronidase (GUS) were found without the need for treatment to block
previously reported putative endogenous nuclease activity.
Keywords:
Allium sativum L. / transient expression / GUS /garlic
Résumé:
Expression transitoire du gène rapporteur de la -glucuronidase chez l'ail
(Allium sativum L.). Le système biolistique a été utilisé pour introduire
l'ADN du gène rapporteur de la -glucuronidase (gus) sous le contrôle du
promoteur CaMV35S, dans trois tissus différents d'ail (Allium sativum L.) :
cals embryogéniques, feuilles et lames de disques basals. L'expression du gène
rapporteur a été testée par histochimie et fluorimétrie après que les tissus
aient été bombardés à l'aide de particules d'or de 1 m de diamètre enrobées d'ADN.
Après le bombardement, on a trouvé de hauts niveaux du -glucuronidase (GUS) et ce
sans qu'un traitement pour bloquer l'activité nucléase endogène soit nécessaire.
-glucuronidase chez l'ail
(Allium sativum L.). Le système biolistique a été utilisé pour introduire
l'ADN du gène rapporteur de la -glucuronidase (gus) sous le contrôle du
promoteur CaMV35S, dans trois tissus différents d'ail (Allium sativum L.) :
cals embryogéniques, feuilles et lames de disques basals. L'expression du gène
rapporteur a été testée par histochimie et fluorimétrie après que les tissus
aient été bombardés à l'aide de particules d'or de 1 m de diamètre enrobées d'ADN.
Après le bombardement, on a trouvé de hauts niveaux du -glucuronidase (GUS) et ce
sans qu'un traitement pour bloquer l'activité nucléase endogène soit nécessaire.
Mots clé :
Allium sativum L. / expression transitoire / GUS / ail
Correspondence and reprints: Esther Ferrer;
e-mail: esther.ferrer@uah.es
Communicated by Nicolás Jouve (Madrid, Spain)
Copyright INRA, EDP Sciences 2000