Agronomie 10 (1990) 605-615
DOI: 10.1051/agro:19900801

Obtention de plantes indemnes du virus de la mosaïque de l'igname (YMV) par culture in vitro des apex chez l'igname américaine Dioscorea trifida L

V. Saleil^a, L. Degras^b, R. Jonard^a, P. Hamard, P. Quétin and P. Bal

^a  Université des Sciences et Techniques du Languedoc, laboratoire d'histophysiologie végétale, 34060 Montpellier Cedex
^b  Centre INRA-Antilles-Guyanne, station d'amélioration des plantes , BP 1232 Pointe-à-Pitre Cedex, France

Résumé - Chez les ignames, une maladie à virus (Yam mosaic virus, YMV) affecte gravement la culture et réduit les échanges de ressources génétiques. La régénération de plantes sans virus a été recherchée, chez Dioscorea trifida L, par culture d'apex de vitroplants issus de boutures nodales de matériel contaminé. Le développement in vitro a été réalisé en 3 phases : - dépôt et reprise du fonctionnement de l'apex sur solution minérale N 30 K de Margara, comportant une cytokinine (BAP à 8,88 μmol/l) et une auxine (AIB à 0,049 μmol/l) - allongement et multiplication des pousses feuillées sont favorisés par un passage sur une solution minérale de Murashige et Skoog avec macroéléments dilués de moitié (MS/2) avec BAP (0,88 μmol/l) et AIB (0,049 μmol/l) - enracinement des vitroplants de longueur suffisante. Il est induit par trempage dans une solution de saccharose (80 g.l^-1) et ANA (2,67 μmol/l). Les vitroplants sont transférés directement en substrat horticole. L'utilisation du test immunoenzymatique ELISA indique que 27% des plantes issues de culture d'apex in vitro sont ainsi débarrassées du YMV.

Abstract - Cleaning the Dioscorea trifida L yam from yam mosaic virus (YMV) through apices in vitro culture. The Dioscorea trifida L yam is particularly susceptible to the yam mosaic virus (YMV) which severely affects most yam cultures and reduces the exchange of genetic resources. Healthy plants have been sought through apical meristem tip in vitro culture of vitroplantlets obtained from nodal explants of diseased material. This was performed in 3 phases : 1) Outgrowth or organisation of the apex over a paper bridge (fig 1) on a mineral solution of Margara ("N 30 K"), including a cytokinin (BAP 8.88 μmol/l, fig 2) an auxin (IBA 0.049 μmol/l) and gibberellin (GA ₃ 2.9 μmol/l); 2) Lengthening and multiplication of leafed buds (fig 3) benefited from one subculture on a mineral solution of Murashige and Skoog with half diluted macro elements (MS/2, table II) BAP (0.88 μmol/l, table III) and IBA (0.049 μmol/l and gibberellin (0.29 μmol/l); 3) Shoots which had grown enough were rooted (fig 4) by dipping in a solution of sucrose (80 g/l) and ANA (2.67 μmol/l, fig 5). The vitroplantlets were directly transferred in horticultural substrate. Those not cleaned could not then express their virus symptoms (fig 6). The application of the immuno enzymatic test Elisa established that 27% of the plants grown from in vitro apex culture are free from YMV (fig 7).

Key words: morphogenesis / organogenesis / phytohormone / Elisa test

Mots clés : morphogenèse / organogenèse / phytohormone / technique ELISA