Agronomie 14 (1994) 327-333
DOI: 10.1051/agro:19940506

Detection of geminiviruses from tropical countries by a double monoclonal antibody ELISA using antibodies to African cassava mosaic virus

L. Givord^a, D. Fargette^b, B. Kounounguissa^c, JC Thouvenel^d, B. Walter^c and MHV Van Regenmortel<sup>a

a</sup>  Immunochimie, Institut de Biologie Moléculaire et Cellulaire du CNRS (IBMC), 15, rue René-Descartes, F67084 Strasbourg cedex
^b  LPRC-ORSTOM, CIRAD, BP 5035, F34032 Montpellier cedex
^c  INRA, BP 507, F68021 Colmar, France
^d  ORSTOM, 13, midan Ibn Afan, Dokki Cairo, Egypte

Abstract - Using double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (DAS-ELISA) tests, monoclonal antibodies (mAbs), which were prepared against particles of a Nigerian isolate of African cassava mosaic virus (ACMV), differentiated African geminiviruses (tomato yellow leaf curl virus, TYLCV; ACMV from West and East Africa; and okra leaf curl virus) from those originating in other countries of the world (euphorbia mosaic virus; Indian cassava mosaic virus; and TYLCV (Indian isolate)). All these viruses belong to the whitefly-transmitted geminivirus subgroup III. One mAb reacted with all 7 tested viruses and isolates. For detecting TYLCV from Senegal, it proved necessary to use a reducing agent in extraction buffer. A diagnostic DAS-ELISA was developed. This relies only on the use of mAbs and is useful for large-scale field screening.

Résumé - Détection de geminivirus de pays tropicaux par DAS-ELISA utilisant des anticorps dirigés contre le virus de la mosaïque africaine du manioc. Des anticorps monoclonaux (AcMc) dirigés contre le virus de la mosaïque africaine du manioc («ACMV») (isolat du Nigéria) et utilisés dans un test DAS-ELISA («double antibody sandwich-ELISA») permettent de distinguer (à l'intérieur du sous-groupe III des geminivirus), les geminivirus originaires dAfrique (ACMV souche Ouest et Est ; virus de l'enroulement jaunissant de la tomate : «TYLCV» ; virus de l'enroulement du gombo) de ceux provenant des autres continents du monde (virus de la mosaïque de l'euphorbe ; virus indien de la mosaïque du manioc ; TYLCV de l'Inde). L'un de ces AcMc réagit avec les 7 geminivirus testés. Néanmoins, la détection du TYLCV (isolat du Sénégal) nécessite un tampon d'extraction spécifique, contenant un agent réducteur. Un test de diagnostic ou de détection utilisant seulement des AcMc, et par conséquent applicable à grande échelle, a été mis au point.

Key words: geminivirus III / monoclonal antibody / ELISA / African cassava mosaic virus / tomato yellow leaf curl virus

Mots clés : geminivirus III / anticorps monoclonaux / ELISA / virus de la mosaïque africaine du manioc / virus de l'enroulement jaunissant de la tomate