Issue
Agronomie
Volume 20, Number 8, December 2000
Page(s) 869 - 874
DOI http://dx.doi.org/10.1051/agro:2000101
DOI: 10.1051/agro:2000101

Agronomie 20 (2000) 869-874

Efficient transient expression of the $\beta$-glucuronidase reporter gene in garlic (Allium sativum L.)

Esther Ferrer - Concha Linares - Juan M. González

Department of Cell Biology and Genetics, University of Alcalá, Campus Universitario, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, Spain

(Received 30 March 2000; accepted 15 June 2000)

Abstract:

A biolistic particle delivery system was used to introduce DNA containing a $\beta$-glucuronidase (gus) reporter gene under the control of the CaMV35S promoter in three different garlic (Allium sativum L.) tissues: embryogenic calli, leaves and basal plate discs. Expression of the reporter gene was assayed histochemically and fluorimetrically when the tissues were bombarded with 1 $\mu$m diameter gold particles coated with DNA, at a distance of 3 cm from the stopping plate and using 1100 psi rupture discs. Following bombardment, high levels of $\beta$-glucuronidase (GUS) were found without the need for treatment to block previously reported putative endogenous nuclease activity.


Keywords: Allium sativum L. / transient expression / GUS /garlic

Résumé:

Expression transitoire du gène rapporteur de la $\beta$-glucuronidase chez l'ail (Allium sativum L.). Le système biolistique a été utilisé pour introduire l'ADN du gène rapporteur de la $\beta$-glucuronidase (gus) sous le contrôle du promoteur CaMV35S, dans trois tissus différents d'ail (Allium sativum L.) : cals embryogéniques, feuilles et lames de disques basals. L'expression du gène rapporteur a été testée par histochimie et fluorimétrie après que les tissus aient été bombardés à l'aide de particules d'or de 1 $\mu$m de diamètre enrobées d'ADN. Après le bombardement, on a trouvé de hauts niveaux du $\beta$-glucuronidase (GUS) et ce sans qu'un traitement pour bloquer l'activité nucléase endogène soit nécessaire.


Mots clé : Allium sativum L. / expression transitoire / GUS / ail

Correspondence and reprints: Esther Ferrer;
e-mail: esther.ferrer@uah.es

Communicated by Nicolás Jouve (Madrid, Spain)

Copyright INRA, EDP Sciences 2000