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Issue
Agronomie
Volume 16, Number 1, 1996
Page(s) 61 - 68
DOI http://dx.doi.org/10.1051/agro:19960104
Agronomie 16 (1996) 61-68
DOI: 10.1051/agro:19960104

Diversity of luteoviruses infecting faba bean (Vicia faba L) in Morocco, and their detection by the polymerase chain reaction

M. Fortassa, F. van der Wilka, R.W. Goldbachb, L. Bosa and J.F.J.M. van den Heuvela

a  DLO Research Institute for Plant Protection (IPO-DLO), PO Box 9060, NL-6700 GW Wageningen
b  Department of Virology, Wageningen Agricultural University, Binnenhaven 11, NL-6709 PD Wageningen, The Netherlands

Abstract - When surveying faba bean (Vicia faba L) for viruses in Morocco, members of the luteovirus group were found to be economically important. In order to further identify them, a number of faba bean samples showing symptoms indicative of luteovirus infection were serologically tested using polyclonal antisera for bean leafroll virus (BLRV), beet western yellows virus (BWYV), and subterranean clover red leaf virus (SCRLV), and two monoclonal antibodies which discriminate between BWYV and BLRV. Several serological reaction patterns were obtained which pointed towards a large variation in the luteovirus isolates studied. None of these isolates could be clearly identified as one of the luteoviruses known to infect legumes, although a number of them behaved like BWYV serologically. The potential of the polymerase chain reaction in detecting these luteoviruses was investigated, and a set of oligonucleotide primers was designed which specifically amplified a 535 bp fragment of the coat protein gene of known luteoviruses and of all the Moroccan isolates tested. In nucleic acid hybridization tests, the field isolates showed homology in nucleotide sequence among the Moroccan isolates and with BLRV, but not wih BWYV. In polyacrylamide gel electrophoresis, a purified Moroccan isolate was found to be different from BLRV and BWYV in coat-protein migration.


Résumé - Diversité des lutéovirus infectant la fève (Vicia faba L) au Maroc et leur détection par la réaction d'amplification enzymatique. Un inventaire des virus de la fève au Maroc a démontré l'incidence économique des lutéovirus sur cette plante. Dans le but de mieux caractériser ces lutéovirus, des échantillons de fève, présentant des symptômes typiques des lutéovirus, ont été testés sérologiquement en utilisant des antisérums polyclonaux contre le virus de l'enroulement de la fève (BLRV), le virus de la jaunisse occidentale de la betterave (BWYV), le virus de la feuille rouge de trèfle souterrain (SCRL V) et deux anticorps monoclonaux discriminant le BLRV du BWYV. La diversité des profils de réaction sérologique obtenus montre qu'il existe une grande variabilité au sein des isolats étudiés. Aucun d'entre eux n'a pu être strictement assimilé aux lutéovirus infectant la famille des légumineuses, bien que certains isolats se soient comportés sérologiquement comme le BWYV. Le potentiel de la réaction d'amplification enzymatique (PCR) pour la détection de ces lutéovirus a été exploré. Nous avons amplifié spécifiquement un fragment de 535 pb du gène codant pour la protéine de capside, aussi bien chez des lutéovirus connus que chez les isolats marocains testés. Lors des tests d'hybridation moléculaire avec une sonde correspondant au gène de la protéine de capside de différents isolats, des homologies de séquences nucléotidiques ont été montrées, d'une part entre les isolats marocains, et d'autre part entre les isolats marocains et le BLRV. Aucune homologie n'a été trouvée entre les isolats marocains et le BWYV. L'électrophorèse sur gel de polyacrylamide a montré que la migration de la protéine de capside d'un isolat marocain purifié est différente de celles des protéines de capside du BLRV et du BWYV.


Key words: Vicia faba L = faba bean / luteovirus / ELISA / PCR / Morocco

Mots clés : Vicia faba L / lutéovirus / ELISA / PCR / Maroc